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應(yīng)用案例 A082-ME09

癌癥研究 | 準(zhǔn)確流量測(cè)控

基礎(chǔ)癌癥研究的主要目的是揭示正常細(xì)胞和癌細(xì)胞之間的差異,便于尋找特定的癌癥脆弱性,從而找到攻擊癌細(xì)胞的方法,同時(shí)不影響正常細(xì)胞。
由于活細(xì)胞比死細(xì)胞顯示更多的信息,荷蘭癌癥研究所使用顯微鏡技術(shù)提取單個(gè)活癌細(xì)胞中蛋白質(zhì)及其相互作用的信息。為了研究這些活細(xì)胞的“自然習(xí)性”,Bronkhorst設(shè)備被采納用于供應(yīng)水蒸氣和氣體例如氮?dú)?、氧氣和二氧化碳,以模擬我們體內(nèi)的環(huán)境條件。

照片來(lái)自Jalink Group / NKI,阿姆斯特丹


應(yīng)用要求

需建立專(zhuān)門(mén)的培養(yǎng)箱來(lái)安置活細(xì)胞,并在類(lèi)似于各種氧氣張力和人體遇到的其他條件的條件下“保持活力”,同時(shí)可通過(guò)顯微鏡觀察。

為此,需將培養(yǎng)箱中的潮濕氣氛準(zhǔn)確控制溫度在37 °C,應(yīng)含CO2至少5%,須控制氧氣含量在2% 到20%之間。

重要議題

  • 準(zhǔn)確控制O2、N2?和 CO2的氣體流量
  • 準(zhǔn)確控制水蒸汽
  • 降低維護(hù)成本

工藝方案

Bronkhorst交付了三臺(tái)帶顯示模塊的EL-FLOW Select質(zhì)量流量控制器用于控制空氣、氮?dú)夂投趸細(xì)怏w供應(yīng)。通過(guò)調(diào)整氣體的相對(duì)流量,形成含有2-19 % O2、0-20 % CO2 和 80-100% N2的氣氛。培養(yǎng)箱中使用這一系列氣體來(lái)研究癌細(xì)胞的行為,例如研究癌細(xì)胞在轉(zhuǎn)移過(guò)程中如何遷移或探索細(xì)胞如何使用化學(xué)信號(hào)相互通信。低氧含量的研究尤其相關(guān),因?yàn)楸娝苤獙?shí)體瘤是缺氧的,也就是說(shuō)它們含有不到百分之幾的氧氣,這改變了細(xì)胞的生理機(jī)能,以及它們對(duì)抗癌藥物的反應(yīng)。

37 °C相對(duì)較高操作溫度的DMEM培養(yǎng)基是一種用于支持活細(xì)胞生長(zhǎng)的鹽溶液,蒸發(fā)得相當(dāng)快。為了補(bǔ)充介質(zhì)中的蒸發(fā)水,使用Bronkhorst μ-FLOW?液體質(zhì)量流量控制器來(lái)提供穩(wěn)定的去離子水流量。結(jié)合帶有PiPS(即插式電源)的BRIGHT控制器,μ-FLOW?裝置可提供0.5 到 9.6 ml/min的受控水流。

根據(jù)經(jīng)驗(yàn),荷蘭癌癥研究所發(fā)現(xiàn)1.3 μl/min的值完全補(bǔ)償了蒸發(fā)。自那時(shí)起,他們可保持細(xì)胞存活數(shù)周并通過(guò)顯微鏡觀察細(xì)胞。使用該裝置,相對(duì)濕度保持在60%以下,有助于避免冷凝可能損壞設(shè)置中的敏感電子設(shè)備。